基因過表達

建立目的基因過表達模型,可用于研究基因功能、基因剂量效应、启动子功能、模拟人类疾病发病机制等。 根据基因整合位点的确定性,可分为两大类:定点条件性基因過表達,随机整合轉基因。

訂閱電子通訊

與最新模式生物資訊保持同步

資料下載

資料下載
下載資料

根據基因整合位點的確定性,可分爲:



定点条件性基因過表達

Rosa26位點是目前最爲常用的定點整合位點之一。它位于小鼠6號染色體,是一個非編碼基因,已被證明在大部分組織和細胞中都有表達。表達比較活躍的基因區域因爲需要轉錄因子的進入基因組結構不會被異染色質化,因此在這個區域定點插入外源DNA,在各組織中表達的可能性都非常高。所以,Rosa26被廣泛用來作爲外源基因表達的安全位點。


利用Cre-LoxP系统对目的基因进行可诱导表达调控。构建Rosa26-(SA/pCAG)-loxp-Stop-loxp-cDNA-pA 重组载体,将条件性过表达结构插入到Rosa26基因intron1中。该类型Knockin小鼠可与各类表达Cre重组酶的工具鼠杂交,获得组织特异性表达外源基因的条件性过表达小鼠模型。


  • 可避免随机整合轉基因模型中多拷贝数、多位点插入、表达不稳定、需要建系等烦恼

  • 可实现外源基因稳定的可调控表达,避免全身性基因過表達可能导致的不可预测的异常表型

  • 可進行超大片段(20-30kb)定點整合

  • 除Rosa26位點以外,另有多個位點可供選用,滿足不同研究需求

  • 可用于基因功能、蛋白功能的過表達研究

  • 可用于KO表型的Rescue實驗

  • 可用于在沒有人同源基因的情況下的人源基因表達模型

  • 可用于人類疾病基因突變


image.png



随机整合轉基因

利用高效PB转座子系统,更高效地获得轉基因小鼠模型。将目的片段克隆至PiggyBAC转座子质粒中,与转座酶一起注射到小鼠受精卵中;在转座酶作用下,目的片段会被整合到基因组上的TTAA位点处,获得轉基因小鼠。由于piggyBac转座子在转座酶的辅助下特异性识别基因组中5’-TTAA-3’位点,精确地剪切和插入不留下印迹,并且在随机插入基因组的过程中,更倾向于插入有活跃转录的位置,故而能够大幅提高轉基因小鼠外源基因的表达阳性率。

  • 快速高效获得轉基因首建鼠Founder

  • 可利用熒光素酶報告基因,通過活體成像系統快速判斷Founder鼠目的基因表達

image.png



聯系我們的技术顾问,设计并定制您的过表达模型吧!


熱門文章

基因編輯可实现性别逆转?YES!

2018年8月份Science期刊上的文章“Sex reversal following deletion of a single distal enhancer of Sox9”,利用基因編輯的方法构建基因敲除小鼠发现,雄性小鼠Enh13基因缺失后会长出卵巢,并且利用基因组学的数据直接证明了Enh13是Sox9基因的增强子,揭示了改变基因的非编码调控区域能够实现性别逆转。

查看
【自閉症日】模型小鼠助力科學研究,讓“星星的孩子”不再“孤獨”

凯时登录平台生物自主研发的Mecp2條件性基因敲除(Mecp2-CKO)小鼠模型,可用于研究MECP2的生理功能、MECP2基因有关的自闭症与瑞特综合征的治病机制和干预治疗。

查看
在線咨詢 请拨打400 728 0660 模型定制方案 回到頂部