基因示蹤

基因示蹤是基因修饰小鼠的一种重要应用,通过基因敲入的形式,将外源的示踪基因敲入到内源基因中,从而可以对基因进行标记和示踪。

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基因示蹤是基因修饰小鼠的一种重要应用,通过基因敲入的形式,将外源的示踪基因敲入到内源基因中,从而可以对基因进行标记和示踪。

可以達到以下3類示蹤目的:

蛋白的亞定位

可將reporter基因敲入到小鼠內源基因的3'端使與內源基因融合表達,通過觀察reporter基因的定位確定內源蛋白的細胞亞定位,如下圖所示:

image.png

蛋白的表達譜

可將reporter基因敲入到小鼠內源基因的3'端,對內源基因進行標記或者替代表達,通過觀察reporter基因的表達了解內源性蛋白的表達情況,例如:是否表達、表達量、表達組織分布),如下圖所示:

image.png

細胞的發育譜系

利用Rosa26-LSL-reporter示蹤小鼠,與特定細胞Marker基因敲入CreER的工具小鼠交配,在子代小鼠中使特定類型細胞被永久標記上reporter熒光,便能通過觀察這些被標記上的熒光信號來追蹤某類特定細胞及其後代所有細胞的增殖、分化以及遷移等活動,爲研究細胞命運及譜系提供有力手段。如下圖所示:

image.png


遗传譜系示蹤应用案例

Enhancing the precision of genetic lineage tracing using dual recombinases


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發表年份

文章題目

發表期刊

2018/1 Genetic Fate Mapping Defines the Vascular Potential of Endocardial Cells in the Adult Heart Circ Res

2017/11

Enhancing the precision of genetic lineage tracing using dual recombinases

Nat Med

2017/8

Fibroblasts in an endocardial fibroelastosis disease model mainly originate from mesenchymal derivatives of?

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Cell Res

2017/7

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Nat Commun

2017/6

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J Clin Invest

2016/11

Mfsd2a+ hepatocytes repopulate the liver during injury and regeneration

Nat Commun

2016/6

Endocardium Minimally Contributes to Coronary? Endothelium in the Embryonic Ventricular Free Walls

Circ Res

2016/3

Genetic lineage tracing identifies endocardial origin of liver vasculature

Nat Genet

2016/1

Endocardium Contributes to Cardiac Fat

Circ Res

2016/1

Genetic lineage tracing identifies in situ Kit-expressing cardiomyocytes

Cell Res

2015/7

c-kit(+) cells adopt vascular endothelial but not epithelial cell fates during lung maintenance and repair

Nat Med


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